選擇生長(zhǎng)健康、無(wú)病害的白菜植株。70%乙醇、次氯酸鈉等，用于表面消毒植物材料。
制備白菜的愈傷組織原生質(zhì)體通常涉及一系列步驟，主要包括表面消毒、愈傷組織的培養(yǎng)和酶解等過程。以下是一個(gè)一般的操作流程：
材料準(zhǔn)備：
1. 白菜胚體：
選擇生長(zhǎng)健康、無(wú)病害的白菜植株。
2. 表面消毒劑：
70%乙醇、次氯酸鈉等，用于表面消毒植物材料。
3. 培養(yǎng)基：
含有植物生長(zhǎng)激素的培養(yǎng)基，如Murashige and Skoog培養(yǎng)基（MS培養(yǎng)基）。
4. 愈傷組織培養(yǎng)條件：
具體培養(yǎng)條件根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和白菜品種而定。
5. 酶液：
植物酶解酶、纖維素酶等，用于酶解植物細(xì)胞壁，釋放原生質(zhì)體。
6. 實(shí)驗(yàn)室用具：
顯微鏡、吸管、移液器、培養(yǎng)皿、濾紙等。
步驟：
1. 表面消毒：
將白菜胚體在流動(dòng)水下清洗，去除表面的塵土。
將白菜胚體浸泡在70%乙醇或次氯酸鈉等表面消毒劑中，進(jìn)行表面消毒。消毒時(shí)間通常在幾分鐘到十幾分鐘之間，具體取決于消毒劑的濃度和植物材料的特性。
2. 剪切和培養(yǎng)：
將表面消毒后的白菜胚體剪成小段。
將這些小段培養(yǎng)在含有植物生長(zhǎng)激素的培養(yǎng)基中，提供適當(dāng)?shù)臏囟群凸庹諚l件。培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和研究目的而定，通常是數(shù)天到數(shù)周。
3. 收獲愈傷組織：
當(dāng)愈傷組織形成并達(dá)到適當(dāng)?shù)拇笮r(shí)，收獲愈傷組織用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
4. 酶解和原生質(zhì)體制備：
將收獲的愈傷組織放入含有植物酶解酶、纖維素酶等的酶液中，進(jìn)行酶解。酶解時(shí)間和溫度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求而定，通常需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行操作。
過濾酶解后的混合物，獲取含有原生質(zhì)體的懸浮液。
5. 培養(yǎng)原生質(zhì)體：
將原生質(zhì)體懸浮液接種到含有植物生長(zhǎng)激素的培養(yǎng)基中，提供適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)條件。
這是一個(gè)一般性的步驟概述，具體的實(shí)驗(yàn)條件和步驟可能因?qū)嶒?yàn)?zāi)康摹⒅参锲贩N和培養(yǎng)條件的不同而有所不同。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前，請(qǐng)確保閱讀相關(guān)的文獻(xiàn)和方法論，以了解適用于您研究的特定條件。同時(shí)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，嚴(yán)格遵循無(wú)菌技術(shù)，以防止外部微生物的污染。
